觀(guan)察的(de)(de)(de)內容包括(kuo)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)是(shi)否(fou)生長(chang)良好，形態是(shi)否(fou)正(zheng)常，有(you)無污染，培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)的(de)(de)(de)PH是(shi)否(fou)太(tai)酸或太(tai)堿（由(you)酚紅指示劑(ji)指示），此外對培(pei)(pei)養(yang)(yang)溫(wen)(wen)度(du)和CO2濃(nong)度(du)也要(yao)(yao)定(ding)時檢(jian)查。一(yi)(yi)(yi)般(ban)(ban)原(yuan)代(dai)(dai)培(pei)(pei)養(yang)(yang)進入(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)后(hou)(hou)有(you)一(yi)(yi)(yi)段(duan)潛(qian)(qian)伏(fu)期(qi)（數小時到數十天不等），在(zai)潛(qian)(qian)伏(fu)期(qi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)一(yi)(yi)(yi)般(ban)(ban)不分(fen)裂(lie)，但可貼壁和游走。過了潛(qian)(qian)伏(fu)期(qi)后(hou)(hou)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)進入(ru)旺盛的(de)(de)(de)分(fen)裂(lie)生長(chang)期(qi)。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)長(chang)滿瓶(ping)底后(hou)(hou)要(yao)(yao)進行(xing)傳代(dai)(dai)培(pei)(pei)養(yang)(yang)，將一(yi)(yi)(yi)瓶(ping)中(zhong)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)消化(hua)懸浮(fu)后(hou)(hou)分(fen)至兩到三瓶(ping)繼續(xu)培(pei)(pei)養(yang)(yang)。每傳代(dai)(dai)一(yi)(yi)(yi)次(ci)稱(cheng)為(wei)“一(yi)(yi)(yi)代(dai)(dai)”。二(er)倍體細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)一(yi)(yi)(yi)般(ban)(ban)只能傳幾(ji)十代(dai)(dai)，而(er)轉化(hua)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)系或細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)株則可無限(xian)(xian)地傳代(dai)(dai)下去。轉化(hua)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)可能具有(you)惡性(xing)性(xing)質，也可能不死性(xing)（Immortality）而(er)無惡性(xing)。培(pei)(pei)養(yang)(yang)正(zheng)在(zai)生長(chang)中(zhong)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)是(shi)進行(xing)各種生物醫(yi)學實驗的(de)(de)(de)良好材(cai)料。四、凍(dong)存(cun)(cun)及復蘇(su)為(wei)了保存(cun)(cun)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)，特別(bie)是(shi)不易獲得(de)的(de)(de)(de)突變(bian)型細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)或細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)株，要(yao)(yao)將細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)(cun)。凍(dong)存(cun)(cun)的(de)(de)(de)溫(wen)(wen)度(du)一(yi)(yi)(yi)般(ban)(ban)用(yong)液氮的(de)(de)(de)溫(wen)(wen)度(du)—－196℃，將細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)收集至凍(dong)存(cun)(cun)管中(zhong)加入(ru)含保護劑(ji)（一(yi)(yi)(yi)般(ban)(ban)為(wei)二(er)甲亞砜或甘油）的(de)(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)，以(yi)一(yi)(yi)(yi)定(ding)的(de)(de)(de)冷(leng)卻速(su)度(du)凍(dong)存(cun)(cun)，終(zhong)保存(cun)(cun)于液氮中(zhong)。在(zai)極低(di)的(de)(de)(de)溫(wen)(wen)度(du)下，細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)保存(cun)(cun)的(de)(de)(de)時間幾(ji)乎是(shi)無限(xian)(xian)的(de)(de)(de)。復蘇(su)一(yi)(yi)(yi)般(ban)(ban)采用(yong)快融方法，即(ji)從液氮中(zhong)取出凍(dong)存(cun)(cun)管后(hou)(hou)，立(li)即(ji)放入(ru)37℃水(shui)中(zhong)，使之在(zai)一(yi)(yi)(yi)分(fen)鐘內迅速(su)融解。然后(hou)(hou)將細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)轉入(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)器皿中(zhong)進行(xing)培(pei)(pei)養(yang)(yang)。心(xin)臟中(zhong)，心(xin)肌成纖維細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)約占(zhan)正(zheng)常心(xin)肌組織細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數的(de)(de)(de)60%-70%。云南小鼠原(yuan)代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)分(fen)離

在(zai)(zai)短時間內即可(ke)大(da)(da)量(liang)擴增，并產(chan)生(sheng)(sheng)(sheng)殺死細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)種(zhong)類繁多(duo)，肉眼可(ke)見，漂浮(fu)于培(pei)養(yang)(yang)液面上(shang)，可(ke)呈絲(si)狀、管狀或樹枝(zhi)狀等。2.合(he)適的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)溫(wen)度一般哺乳(ru)類與(yu)(yu)禽類細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)體(ti)(ti)(ti)外(wai)培(pei)養(yang)(yang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)適宜溫(wen)度是(shi)37～38℃，不(bu)適宜的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)環(huan)(huan)境(jing)溫(wen)度會(hui)影(ying)響細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)生(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)。細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)對低溫(wen)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)耐受能(neng)(neng)(neng)力要強于對高溫(wen)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)耐受能(neng)(neng)(neng)力，在(zai)(zai)低溫(wen)下，細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)代(dai)(dai)(dai)謝活力及核(he)分裂能(neng)(neng)(neng)力降低。若溫(wen)度不(bu)低于0℃，雖然(ran)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)代(dai)(dai)(dai)謝受到影(ying)響，但無損傷作用(yong)；25～35℃時，細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)以緩(huan)慢的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)速度生(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)；但若被置(zhi)于40℃數(shu)小(xiao)時，則不(bu)不(bu)利于細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)生(sheng)(sheng)(sheng)存、生(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)，甚(shen)至可(ke)導致(zhi)其(qi)死亡。3.適宜的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)滲透壓(ya)(ya)高滲溶液或低滲溶液會(hui)引起細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)發生(sheng)(sheng)(sheng)褶皺、腫(zhong)脹、破裂。因此，滲透壓(ya)(ya)是(shi)體(ti)(ti)(ti)外(wai)培(pei)養(yang)(yang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)重要條件之(zhi)一。多(duo)數(shu)體(ti)(ti)(ti)外(wai)培(pei)養(yang)(yang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)對滲透壓(ya)(ya)都有(you)一定(ding)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)耐受能(neng)(neng)(neng)力，實際應用(yong)中，260～320mmol/L的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)滲透壓(ya)(ya)可(ke)適用(yong)于大(da)(da)多(duo)數(shu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。4．氣(qi)(qi)體(ti)(ti)(ti)環(huan)(huan)境(jing)與(yu)(yu)pH細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)體(ti)(ti)(ti)外(wai)培(pei)養(yang)(yang)需要理想(xiang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)氣(qi)(qi)體(ti)(ti)(ti)環(huan)(huan)境(jing)，氧(yang)氣(qi)(qi)、二氧(yang)化(hua)碳(tan)是(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)生(sheng)(sheng)(sheng)存的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)必要條件。氧(yang)氣(qi)(qi)參(can)與(yu)(yu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)三羧酸循環(huan)(huan)，為細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)生(sheng)(sheng)(sheng)存、代(dai)(dai)(dai)謝與(yu)(yu)合(he)成(cheng)提供能(neng)(neng)(neng)量(liang)；二氧(yang)化(hua)碳(tan)既是(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)代(dai)(dai)(dai)謝產(chan)物，是(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)生(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)必需成(cheng)分，又與(yu)(yu)維持培(pei)養(yang)(yang)液的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)pH有(you)關。大(da)(da)多(duo)數(shu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)適宜的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)pH范圍往(wang)往(wang)是(shi)～。在(zai)(zai)開放式培(pei)養(yang)(yang)中，以5%的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)二氧(yang)化(hua)碳(tan)氣(qi)(qi)體(ti)(ti)(ti)比例為宜。寧夏血(xue)液原代(dai)(dai)(dai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)購買(mai)人臍靜脈內皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)分離自臍帶靜脈，一般用(yong)于生(sheng)(sheng)(sheng)理學(xue)和藥理學(xue)研究。

下(xia)端(duan)伸入瓶身(shen)并與設(she)于瓶身(shen)內的(de)(de)(de)(de)纖維板(ban)固(gu)定(ding)連接(jie)(jie)(jie)，并且在活(huo)(huo)動圓(yuan)盤(pan)(pan)和(he)(he)(he)纖維圓(yuan)盤(pan)(pan)之間(jian)(jian)的(de)(de)(de)(de)連接(jie)(jie)(jie)桿上套(tao)裝有(you)(you)彈(dan)簧(huang)。進(jin)(jin)一(yi)(yi)(yi)步(bu)(bu)的(de)(de)(de)(de)，所(suo)述(shu)活(huo)(huo)動圓(yuan)盤(pan)(pan)的(de)(de)(de)(de)四(si)(si)周設(she)有(you)(you)密封圈。進(jin)(jin)一(yi)(yi)(yi)步(bu)(bu)的(de)(de)(de)(de)，所(suo)述(shu)彈(dan)簧(huang)處(chu)于自然狀(zhuang)態(tai)(tai)或輕微壓縮(suo)狀(zhuang)態(tai)(tai)時(shi)，活(huo)(huo)動圓(yuan)盤(pan)(pan)與阻(zu)隔環相(xiang)接(jie)(jie)(jie)觸。進(jin)(jin)一(yi)(yi)(yi)步(bu)(bu)的(de)(de)(de)(de)，所(suo)述(shu)纖維板(ban)采用具有(you)(you)阻(zu)隔和(he)(he)(he)透(tou)氣(qi)特(te)性的(de)(de)(de)(de)柔(rou)(rou)性網(wang)(wang)格纖維材料制作。進(jin)(jin)一(yi)(yi)(yi)步(bu)(bu)的(de)(de)(de)(de)，所(suo)述(shu)外(wai)接(jie)(jie)(jie)圓(yuan)柱的(de)(de)(de)(de)直(zhi)徑(jing)為2cm，所(suo)述(shu)正壓口(kou)的(de)(de)(de)(de)直(zhi)徑(jing)為5mm，并可(ke)采用肝素帽(mao)封閉。進(jin)(jin)一(yi)(yi)(yi)步(bu)(bu)的(de)(de)(de)(de)，所(suo)述(shu)活(huo)(huo)動圓(yuan)盤(pan)(pan)和(he)(he)(he)纖維圓(yuan)盤(pan)(pan)的(de)(de)(de)(de)直(zhi)徑(jing)為。進(jin)(jin)一(yi)(yi)(yi)步(bu)(bu)的(de)(de)(de)(de)，所(suo)述(shu)加樣口(kou)為直(zhi)徑(jing)，該開口(kou)可(ke)通過螺紋連接(jie)(jie)(jie)透(tou)氣(qi)瓶蓋。進(jin)(jin)一(yi)(yi)(yi)步(bu)(bu)的(de)(de)(de)(de)，所(suo)述(shu)瓶身(shen)底部的(de)(de)(de)(de)四(si)(si)個(ge)角設(she)置有(you)(you)8個(ge)直(zhi)角三角支架。本(ben)發(fa)明(ming)的(de)(de)(de)(de)有(you)(you)益效(xiao)果如下(xia)：本(ben)發(fa)明(ming)可(ke)以根據所(suo)要(yao)爬片(pian)的(de)(de)(de)(de)組織(zhi)塊大小和(he)(he)(he)數量提(ti)(ti)供25cm2和(he)(he)(he)75cm2兩種不(bu)同規格長方體(ti)(ti)瓶身(shen)供爬片(pian)，能提(ti)(ti)高(gao)爬片(pian)的(de)(de)(de)(de)效(xiao)率。本(ben)發(fa)明(ming)采用一(yi)(yi)(yi)體(ti)(ti)式設(she)計(ji)，減少了原代細(xi)胞(bao)提(ti)(ti)取過程(cheng)中易(yi)發(fa)生的(de)(de)(de)(de)污染的(de)(de)(de)(de)可(ke)能性，另外(wai)一(yi)(yi)(yi)體(ti)(ti)式設(she)計(ji)也減少了新手或不(bu)熟練操作流程(cheng)實驗員的(de)(de)(de)(de)時(shi)間(jian)(jian)成本(ben)和(he)(he)(he)器材消(xiao)耗。本(ben)發(fa)明(ming)巧妙的(de)(de)(de)(de)利用纖維網(wang)(wang)格板(ban)，一(yi)(yi)(yi)方面網(wang)(wang)格板(ban)的(de)(de)(de)(de)材質(zhi)是柔(rou)(rou)性的(de)(de)(de)(de)，不(bu)易(yi)因(yin)形變而碎裂，另一(yi)(yi)(yi)方面不(bu)僅可(ke)以固(gu)定(ding)組織(zhi)塊，網(wang)(wang)格設(she)計(ji)還可(ke)以讓培養基滲入，可(ke)謂一(yi)(yi)(yi)舉兩得，且網(wang)(wang)格板(ban)孔(kong)徑(jing)大小可(ke)以定(ding)制，滿足不(bu)同受眾的(de)(de)(de)(de)要(yao)求。

每(mei)15min搖晃一次，消(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)時(shi)(shi)間根(gen)據(ju)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)來定，約1-2h；5.待大部分(fen)(fen)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)塊消(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)成(cheng)(cheng)透明狀時(shi)(shi)，用(yong)(yong)40μm的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)濾網過濾細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，收集；6.用(yong)(yong)培(pei)(pei)養(yang)基重(zhong)懸，置于(yu)培(pei)(pei)養(yang)箱培(pei)(pei)養(yang)。常(chang)見問題解答：Q：為什么(me)我(wo)取(qu)(qu)得原(yuan)代織(zhi)(zhi)(zhi)，分(fen)(fen)離的(de)(de)(de)(de)卻不是細(xi)(xi)胞(bao)(bao)？A：取(qu)(qu)材時(shi)(shi)，我(wo)們要(yao)(yao)熟悉(xi)所需(xu)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)類(lei)型和(he)部位特(te)征，選擇(ze)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)集中、活力(li)較好的(de)(de)(de)(de)部分(fen)(fen)。避免結締等(deng)正常(chang)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)。Q：若(ruo)是細(xi)(xi)胞(bao)(bao)中混成(cheng)(cheng)纖(xian)(xian)維(wei)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，如(ru)何(he)去除？A：成(cheng)(cheng)纖(xian)(xian)維(wei)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)去除對于(yu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養(yang)十(shi)分(fen)(fen)重(zhong)要(yao)(yao)。由于(yu)成(cheng)(cheng)纖(xian)(xian)維(wei)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)貼壁(bi)速(su)度細(xi)(xi)胞(bao)(bao)快(kuai)，可(ke)(ke)利用(yong)(yong)反復貼壁(bi)法使二者分(fen)(fen)離，進而達(da)到成(cheng)(cheng)纖(xian)(xian)維(wei)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)目(mu)的(de)(de)(de)(de)。Q：為什么(me)離心后，沒有細(xi)(xi)胞(bao)(bao)分(fen)(fen)離出來？A：需(xu)要(yao)(yao)考慮消(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)酶(mei)(mei)(mei)(mei)的(de)(de)(de)(de)因素，由于(yu)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)較致密，胰酶(mei)(mei)(mei)(mei)無法消(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)，一般選用(yong)(yong)膠(jiao)原(yuan)酶(mei)(mei)(mei)(mei)，如(ru)膠(jiao)原(yuan)酶(mei)(mei)(mei)(mei)Ⅳ。若(ruo)是組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)十(shi)分(fen)(fen)致密可(ke)(ke)以再結合機械法，如(ru)研磨或者攪(jiao)拌加速(su)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)分(fen)(fen)散。如(ru)下表為二者的(de)(de)(de)(de)區(qu)別：膠(jiao)原(yuan)酶(mei)(mei)(mei)(mei)胰酶(mei)(mei)(mei)(mei)來源(yuan)細(xi)(xi)菌胰臟消(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)纖(xian)(xian)維(wei)多(duo)的(de)(de)(de)(de)硬組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)軟組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)對細(xi)(xi)胞(bao)(bao)影響傷害小長時(shi)(shi)間有損傷作用(yong)(yong)力(li)度緩和(he)強注：膠(jiao)原(yuan)酶(mei)(mei)(mei)(mei)分(fen)(fen)為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細(xi)(xi)胞(bao)(bao)膠(jiao)原(yuan)酶(mei)(mei)(mei)(mei)，根(gen)據(ju)分(fen)(fen)離的(de)(de)(de)(de)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)類(lei)型需(xu)選擇(ze)合適(shi)的(de)(de)(de)(de)膠(jiao)原(yuan)酶(mei)(mei)(mei)(mei)類(lei)型。Q：消(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)時(shi)(shi)間如(ru)何(he)確定？A：具體的(de)(de)(de)(de)消(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)酶(mei)(mei)(mei)(mei)的(de)(de)(de)(de)量(liang)和(he)消(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)時(shi)(shi)間可(ke)(ke)根(gen)據(ju)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)類(lei)型和(he)多(duo)少進行調整。Q：消(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)之前(qian)為什么(me)用(yong)(yong)EDTA?A：EDTA是一種非酶(mei)(mei)(mei)(mei)消(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)物，又稱螯合劑，對一些(xie)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)。轉(zhuan)染(ran)的(de)(de)(de)(de)目(mu)的(de)(de)(de)(de)是產生重(zhong)組(zu)(zu)蛋白，或特(te)異(yi)性增(zeng)強或控制(zhi)轉(zhuan)染(ran)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)中的(de)(de)(de)(de)基因表達(da)。

展開全部(bu)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)2113細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)和傳(chuan)(chuan)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)有(you)含義5261、培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)過(guo)(guo)程(cheng)、培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)結(jie)(jie)果和應(ying)用四個方(fang)面4102區(qu)別：16531、含義不(bu)同原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)是(shi)(shi)直接從生物(wu)體獲取組織或的(de)(de)(de)一(yi)部(bu)分(fen)(fen)進(jin)(jin)行(xing)(xing)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)，也稱初代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)。原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)是(shi)(shi)將培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)物(wu)放置(zhi)在體外生長(chang)(chang)環境中(zhong)持(chi)續(xu)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)，中(zhong)途不(bu)分(fen)(fen)割(ge)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)物(wu)的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)過(guo)(guo)程(cheng)。有(you)幾(ji)(ji)方(fang)面含義：原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)中(zhong)的(de)(de)(de)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)并(bing)非(fei)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)數，因為(wei)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)過(guo)(guo)程(cheng)中(zhong)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)經多次(ci)分(fen)(fen)裂已經產生多代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)子細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)。傳(chuan)(chuan)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)是(shi)(shi)指需要將培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)物(wu)分(fen)(fen)割(ge)成(cheng)小的(de)(de)(de)部(bu)分(fen)(fen)，重新接種到另外的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)器皿（瓶）內(nei)(nei)，再進(jin)(jin)行(xing)(xing)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)的(de)(de)(de)過(guo)(guo)程(cheng)。2、培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)過(guo)(guo)程(cheng)不(bu)同原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)的(de)(de)(de)基本(ben)過(guo)(guo)程(cheng)包括取材、培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)材料的(de)(de)(de)制(zhi)備(bei)、接種、加(jia)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)液(ye)、置(zhi)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)條(tiao)件下培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)等(deng)步驟(zou)，在所有(you)的(de)(de)(de)操(cao)作(zuo)過(guo)(guo)程(cheng)中(zhong)，都必(bi)須保持(chi)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)物(wu)及生長(chang)(chang)環境的(de)(de)(de)無菌(jun)。傳(chuan)(chuan)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)時(shi)要注意無菌(jun)操(cao)作(zuo)并(bing)防止(zhi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)之間(jian)的(de)(de)(de)交(jiao)叉污染。所有(you)操(cao)作(zuo)要盡量靠近酒精燈火(huo)焰。每次(ci)只進(jin)(jin)行(xing)(xing)一(yi)種細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)操(cao)作(zuo)。取出長(chang)(chang)成(cheng)單層的(de)(de)(de)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，倒掉瓶內(nei)(nei)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)液(ye)，加(jia)入消(xiao)化(hua)液(ye)。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)變圓，相互之間(jian)不(bu)再連片時(shi)將消(xiao)化(hua)液(ye)倒掉，加(jia)入新鮮培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)液(ye)，吹打，制(zhi)成(cheng)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸液(ye)。3、培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)結(jie)(jie)果不(bu)同原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)會分(fen)(fen)裂。原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)一(yi)般(ban)傳(chuan)(chuan)至10代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)左右就(jiu)(jiu)不(bu)容易傳(chuan)(chuan)下去了，細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)生長(chang)(chang)就(jiu)(jiu)會出現停滯，大部(bu)分(fen)(fen)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)衰老死亡。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)接種后(hou)一(yi)般(ban)幾(ji)(ji)小時(shi)內(nei)(nei)就(jiu)(jiu)能貼壁，并(bing)開始生長(chang)(chang)。本(ben)公司生產的(de)(de)(de)SD大鼠(shu)(shu)心肌成(cheng)纖(xian)維細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)采用混合酶消(xiao)化(hua)、密度梯度離心制(zhi)備(bei)而(er)來。內(nei)(nei)蒙古大鼠(shu)(shu)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)購買

細(xi)(xi)胞(bao)操(cao)作都需嚴格按照(zhao)無(wu)菌(jun)操(cao)作進行。云南小鼠原代細(xi)(xi)胞(bao)分(fen)離(li)

本實(shi)用(yong)新(xin)型(xing)涉及(ji)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)箱(xiang)(xiang)領域，尤其(qi)涉及(ji)的(de)(de)(de)是(shi)一(yi)種新(xin)型(xing)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)箱(xiang)(xiang)。背景技術：現有(you)技術中(zhong)，原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)，是(shi)指由(you)體內取出組織(zhi)或(huo)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)進(jin)行(xing)(xing)(xing)的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)，也叫初代(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)。原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)離體時間短，遺傳性狀和(he)體內細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)相似，適于做細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)形態、功(gong)能(neng)和(he)分化(hua)等研究。較為(wei)嚴格地(di)(di)說是(shi)指成功(gong)傳代(dai)(dai)之前的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)，此時的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)保(bao)持(chi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)有(you)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)基本性質，如(ru)果是(shi)正常細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，仍然保(bao)留(liu)二倍體數(shu)。但(dan)實(shi)際上(shang)，通常把代(dai)(dai)至第(di)十代(dai)(dai)以(yi)內的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)統稱為(wei)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)。利(li)用(yong)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)，可對細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)進(jin)行(xing)(xing)(xing)藥(yao)物的(de)(de)(de)篩選，根據細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)對加(jia)入的(de)(de)(de)化(hua)療(liao)藥(yao)物的(de)(de)(de)敏(min)感性來幫助選擇的(de)(de)(de)化(hua)療(liao)方案(an)，有(you)可能(neng)起到增強療(liao)效、降低副(fu)作用(yong)的(de)(de)(de)作用(yong)。而實(shi)驗(yan)室(shi)在進(jin)行(xing)(xing)(xing)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)過程(cheng)中(zhong)，為(wei)得到更多的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)進(jin)行(xing)(xing)(xing)篩查，往往需(xu)要同時對大量(liang)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)進(jin)行(xing)(xing)(xing)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)，而市面(mian)上(shang)單層或(huo)雙(shuang)層設計(ji)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)箱(xiang)(xiang)已難以(yi)滿足實(shi)驗(yan)者的(de)(de)(de)需(xu)求，另外市面(mian)上(shang)也有(you)一(yi)些原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)箱(xiang)(xiang)，但(dan)其(qi)儲藏空(kong)間設計(ji)不(bu)合理(li)，空(kong)間利(li)用(yong)率低，在存放(fang)(fang)大量(liang)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)皿(min)時，其(qi)占地(di)(di)面(mian)積也大，不(bu)方便實(shi)驗(yan)者存放(fang)(fang)。同時，無(wu)毒和(he)無(wu)菌是(shi)體外培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)首要條件，培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)皿(min)作為(wei)用(yong)于細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)的(de)(de)(de)主要實(shi)驗(yan)室(shi)器皿(min)，常存儲于細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)箱(xiang)(xiang)內進(jin)行(xing)(xing)(xing)貯藏培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)，市場上(shang)的(de)(de)(de)大型(xing)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)箱(xiang)(xiang)由(you)于空(kong)間設計(ji)過大。云南小鼠原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)分離

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