在(zai)(zai)心(xin)血(xue)管(guan)藥(yao)(yao)理研(yan)究(jiu)中的(de)應(ying)用，隨(sui)著膜(mo)(mo)(mo)片(pian)(pian)鉗(qian)技(ji)術(shu)在(zai)(zai)心(xin)血(xue)管(guan)方(fang)面的(de)廣泛應(ying)用，對血(xue)管(guan)疾病和藥(yao)(yao)物作(zuo)用的(de)認(ren)識不僅得(de)到了不斷(duan)更(geng)新(xin)，而且(qie)在(zai)(zai)其病因學與藥(yao)(yao)理學方(fang)面還(huan)形成了許多(duo)新(xin)的(de)觀(guan)點(dian)。正如(ru)諾貝爾基金會(hui)在(zai)(zai)頒獎時(shi)所說：“Neher和Sadmann的(de)貢獻有利于了解不同(tong)疾病機理，為研(yan)制新(xin)的(de)更(geng)為的(de)藥(yao)(yao)物開辟了道路”。目(mu)前在(zai)(zai)離子通(tong)道高通(tong)量(liang)(liang)(liang)篩(shai)選(xuan)中主要是進行樣(yang)品量(liang)(liang)(liang)大、篩(shai)選(xuan)速度占優勢、信息量(liang)(liang)(liang)要求(qiu)不太高的(de)初級篩(shai)選(xuan)。近幾年，分別形成了以膜(mo)(mo)(mo)片(pian)(pian)鉗(qian)和熒(ying)光探針為基礎(chu)的(de)兩大主流技(ji)術(shu)市(shi)場。將電生理研(yan)究(jiu)信息量(liang)(liang)(liang)大、靈敏度高等(deng)特點(dian)與自動化(hua)、微量(liang)(liang)(liang)化(hua)技(ji)術(shu)相結合，產(chan)生了自動化(hua)膜(mo)(mo)(mo)片(pian)(pian)鉗(qian)等(deng)一(yi)些新(xin)技(ji)術(shu)。滔(tao)博生物TOP-Bright專注(zhu)基于多(duo)種離子通(tong)道靶點(dian)的(de)化(hua)合物體(ti)外篩(shai)選(xuan),服務于全球藥(yao)(yao)企(qi)的(de)膜(mo)(mo)(mo)片(pian)(pian)鉗(qian)公司(si),快(kuai)速獲得(de)實驗結果,專業團隊,7*52小時(shi)隨(sui)時(shi)人工在(zai)(zai)線咨詢(xun).一(yi)些學者建立(li)了組織(zhi)切片(pian)(pian)膜(mo)(mo)(mo)片(pian)(pian)鉗(qian)技(ji)術(shu)（Slicepatch），就能在(zai)(zai)哺乳動物腦(nao)片(pian)(pian)制備上(shang)做全細(xi)胞(bao)記錄(lu)。日本全細(xi)胞(bao)膜(mo)(mo)(mo)片(pian)(pian)鉗(qian)系統

膜(mo)片(pian)鉗技術(shu)(shu)的(de)(de)(de)發(fa)(fa)展∶全自動(dong)膜(mo)片(pian)鉗技術(shu)(shu)（Automated patch clamp technique）的(de)(de)(de)出(chu)現(xian)標志著膜(mo)片(pian)鉗技術(shu)(shu)已經發(fa)(fa)展到(dao)了(le)(le)一(yi)個(ge)(ge)嶄新階段，從這(zhe)(zhe)個(ge)(ge)意義(yi)上說，前面所講的(de)(de)(de)膜(mo)片(pian)鉗技術(shu)(shu)我們稱之為傳統膜(mo)片(pian)鉗技術(shu)(shu)（ Traditional patch clamp technique），傳統膜(mo)片(pian)鉗技術(shu)(shu)每次(ci)只能記(ji)(ji)(ji)錄一(yi)個(ge)(ge)細胞(bao)(bao)(bao)（或(huo)一(yi)對細胞(bao)(bao)(bao)），對實驗(yan)人(ren)員(yuan)來說是一(yi)項(xiang)耗(hao)時耗(hao)力的(de)(de)(de)工作，不適(shi)合(he)(he)在藥物開發(fa)(fa)初期和中期進(jin)行(xing)(xing)大(da)量化合(he)(he)物的(de)(de)(de)篩選(xuan)，也不適(shi)合(he)(he)需(xu)要記(ji)(ji)(ji)錄火量細胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)基礎實驗(yan)研究(jiu)。全自動(dong)膜(mo)片(pian)鉗技術(shu)(shu)的(de)(de)(de)出(chu)現(xian)在很大(da)程度上解(jie)決了(le)(le)這(zhe)(zhe)些問題，它不僅通量高(gao)(gao)，一(yi)次(ci)能記(ji)(ji)(ji)錄幾個(ge)(ge)甚至(zhi)幾十個(ge)(ge)細胞(bao)(bao)(bao)，而(er)且從找(zhao)細胞(bao)(bao)(bao)、形成封接、破膜(mo)等(deng)整個(ge)(ge)實驗(yan)操(cao)作實現(xian)了(le)(le)自動(dong)化，免除了(le)(le)這(zhe)(zhe)些操(cao)作的(de)(de)(de)復(fu)雜(za)與(yu)困難。這(zhe)(zhe)兩個(ge)(ge)優點使(shi)得膜(mo)片(pian)鉗技術(shu)(shu)的(de)(de)(de)工作效(xiao)率提高(gao)(gao)了(le)(le)!全自動(dong)膜(mo)片(pian)鉗技術(shu)(shu)采用的(de)(de)(de)標本(ben)必須是懸浮細胞(bao)(bao)(bao)，像腦(nao)片(pian)這(zhe)(zhe)類標本(ben)無法采用。此外(wai)，全自動(dong)膜(mo)片(pian)鉗技術(shu)(shu)只能進(jin)行(xing)(xing)全細胞(bao)(bao)(bao)記(ji)(ji)(ji)錄模式、穿孔膜(mo)片(pian)鉗記(ji)(ji)(ji)錄模式以及細胞(bao)(bao)(bao)貼附式單(dan)通道(dao)記(ji)(ji)(ji)錄模式，而(er)不能進(jin)行(xing)(xing)其他模式的(de)(de)(de)記(ji)(ji)(ji)錄。雙(shuang)分子(zi)(zi)層(ceng)膜(mo)片(pian)鉗細胞(bao)(bao)(bao)功(gong)能特性這(zhe)(zhe)是一(yi)種以記(ji)(ji)(ji)錄通過離(li)(li)子(zi)(zi)通道(dao)的(de)(de)(de)離(li)(li)子(zi)(zi)電流來反映細胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)單(dan)一(yi)的(de)(de)(de)或(huo)多個(ge)(ge)的(de)(de)(de)離(li)(li)子(zi)(zi)通道(dao)分子(zi)(zi)活動(dong)的(de)(de)(de)技術(shu)(shu)。

膜(mo)片鉗(qian)技術的(de)(de)建立1.拋(pao)光(guang)及填(tian)(tian)充好玻璃管(guan)微(wei)電(dian)(dian)(dian)(dian)極(ji)(ji)，并將它固定在電(dian)(dian)(dian)(dian)極(ji)(ji)夾持(chi)器(qi)(qi)中(zhong)。2.通過(guo)一(yi)個(ge)(ge)與電(dian)(dian)(dian)(dian)極(ji)(ji)夾持(chi)器(qi)(qi)連接(jie)的(de)(de)導(dao)管(guan)給微(wei)電(dian)(dian)(dian)(dian)極(ji)(ji)內(nei)一(yi)個(ge)(ge)壓(ya)力(li)，一(yi)直(zhi)(zhi)到(dao)電(dian)(dian)(dian)(dian)極(ji)(ji)浸(jin)入記錄(lu)槽溶(rong)(rong)液中(zhong)。3.當電(dian)(dian)(dian)(dian)極(ji)(ji)浸(jin)沒在溶(rong)(rong)液中(zhong)時給電(dian)(dian)(dian)(dian)極(ji)(ji)一(yi)個(ge)(ge)測(ce)定脈沖（命令電(dian)(dian)(dian)(dian)壓(ya)，如(ru)5-10ms，10mV）讀出電(dian)(dian)(dian)(dian)流，按照歐姆定律計算電(dian)(dian)(dian)(dian)阻(zu)。4.通過(guo)膜(mo)片鉗(qian)放(fang)(fang)大(da)(da)器(qi)(qi)的(de)(de)控制(zhi)鍵將微(wei)電(dian)(dian)(dian)(dian)極(ji)(ji)前(qian)列(lie)的(de)(de)連接(jie)電(dian)(dian)(dian)(dian)位（junctionpotentials）調至(zhi)零位，這種電(dian)(dian)(dian)(dian)位差是(shi)由于電(dian)(dian)(dian)(dian)極(ji)(ji)內(nei)填(tian)(tian)充溶(rong)(rong)液與浸(jin)浴液不同離子成分(fen)的(de)(de)遷(qian)移造成的(de)(de)。5.用微(wei)操縱器(qi)(qi)將微(wei)電(dian)(dian)(dian)(dian)極(ji)(ji)前(qian)列(lie)在直(zhi)(zhi)視下(xia)靠近要記錄(lu)的(de)(de)細(xi)胞(bao)表面，并觀察電(dian)(dian)(dian)(dian)流的(de)(de)變化，直(zhi)(zhi)至(zhi)阻(zu)抗達到(dao)1GΩ以(yi)上形(xing)成"干兆封(feng)接(jie)"6.調整(zheng)靜(jing)息(xi)膜(mo)電(dian)(dian)(dian)(dian)位到(dao)期望的(de)(de)鉗(qian)位電(dian)(dian)(dian)(dian)壓(ya)的(de)(de)水平，使放(fang)(fang)大(da)(da)器(qi)(qi)從"搜尋"轉到(dao)"電(dian)(dian)(dian)(dian)壓(ya)鉗(qian)"時細(xi)胞(bao)不至(zhi)于鉗(qian)位到(dao)零。

1980年(nian)(nian)，Sigworth、Hamill、Neher等在記(ji)錄電(dian)極內施(shi)加(jia)負壓吸引，得到了10~100GΩ的(de)(de)高阻封接（gigaseal），降低記(ji)錄噪(zao)聲，實(shi)現(xian)了單(dan)根電(dian)極既鉗制膜(mo)(mo)電(dian)位又記(ji)錄單(dan)通(tong)道電(dian)流。獲1991年(nian)(nian)Nobel獎。1955年(nian)(nian)，Hodgkin和(he)(he)Keens應用電(dian)壓鉗（Voltageclap）在研究神經(jing)軸(zhou)(zhou)突膜(mo)(mo)對鉀(jia)離子通(tong)透性時發現(xian)放射性鉀(jia)跨軸(zhou)(zhou)突膜(mo)(mo)的(de)(de)運動(dong)(dong)(dong)很像是通(tong)過許多狹(xia)窄空洞(dong)的(de)(de)運動(dong)(dong)(dong)，并(bing)提出了"通(tong)道"的(de)(de)概(gai)念。1963年(nian)(nian)，描述(shu)電(dian)壓門控動(dong)(dong)(dong)力(li)學(xue)(xue)的(de)(de)Hodgkin-Hx上模(mo)型(xing)（簡稱H-H模(mo)型(xing)）榮獲譜(pu)貝(bei)爾(er)醫學(xue)(xue)/生理學(xue)(xue)獎。1976年(nian)(nian)，Neher和(he)(he)Sakmann建(jian)立膜(mo)(mo)片(pian)鉗（Patchclamp）按術。1983年(nian)(nian)10月，《Single-ChannelRecording》一書問(wen)世，奠(dian)定(ding)了膜(mo)(mo)片(pian)鉗技術的(de)(de)里程碑。1991年(nian)(nian)，Neher和(he)(he)Sakmann的(de)(de)膜(mo)(mo)片(pian)鋪技術榮獲諾貝(bei)爾(er)醫學(xue)(xue)/生理學(xue)(xue)獎。膜(mo)(mo)電(dian)位Vm由高輸入阻抗的(de)(de)電(dian)壓跟(gen)隨器所(suo)測量。

離(li)(li)子(zi)(zi)(zi)(zi)通(tong)(tong)(tong)道(dao)(dao)(dao)是一種特殊的(de)(de)(de)(de)(de)膜(mo)(mo)蛋白，它橫(heng)跨(kua)整個(ge)(ge)膜(mo)(mo)結構，是細(xi)胞(bao)(bao)內(nei)部與(yu)(yu)部外(wai)聯系的(de)(de)(de)(de)(de)橋梁和(he)(he)細(xi)胞(bao)(bao)內(nei)外(wai)物質(zhi)交換的(de)(de)(de)(de)(de)孔道(dao)(dao)(dao)，當(dang)通(tong)(tong)(tong)道(dao)(dao)(dao)開放時。細(xi)胞(bao)(bao)內(nei)外(wai)的(de)(de)(de)(de)(de)一些無機(ji)離(li)(li)子(zi)(zi)(zi)(zi)如Na，kCa等(deng)(deng)帶(dai)電(dian)(dian)離(li)(li)子(zi)(zi)(zi)(zi)可經通(tong)(tong)(tong)道(dao)(dao)(dao)順濃度(du)梯度(du)或(huo)電(dian)(dian)位梯度(du)進(jin)行跨(kua)膜(mo)(mo)擴散(san)，從(cong)而形成這(zhe)些帶(dai)電(dian)(dian)離(li)(li)子(zi)(zi)(zi)(zi)在(zai)(zai)膜(mo)(mo)內(nei)外(wai)的(de)(de)(de)(de)(de)不(bu)同(tong)分(fen)布態勢(shi)，這(zhe)種態勢(shi)和(he)(he)在(zai)(zai)不(bu)同(tong)狀態下的(de)(de)(de)(de)(de)動態變(bian)化是可興奮細(xi)胞(bao)(bao)靜息(xi)電(dian)(dian)位和(he)(he)動作電(dian)(dian)的(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)礎(chu)。這(zhe)些無機(ji)離(li)(li)子(zi)(zi)(zi)(zi)通(tong)(tong)(tong)過離(li)(li)子(zi)(zi)(zi)(zi)通(tong)(tong)(tong)道(dao)(dao)(dao)的(de)(de)(de)(de)(de)進(jin)圍所產(chan)生(sheng)(sheng)的(de)(de)(de)(de)(de)電(dian)(dian)活(huo)動是生(sheng)(sheng)命活(huo)動的(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)礎(chu)，只有(you)在(zai)(zai)此基(ji)礎(chu)上(shang)才可能有(you)腺體分(fen)泌、肌肉收縮、基(ji)因表達、新陳代謝(xie)等(deng)(deng)生(sheng)(sheng)命活(huo)動。離(li)(li)子(zi)(zi)(zi)(zi)通(tong)(tong)(tong)道(dao)(dao)(dao)結構和(he)(he)功能障礙決定了許(xu)多疾(ji)病(bing)的(de)(de)(de)(de)(de)發生(sheng)(sheng)和(he)(he)發展。因此，了解離(li)(li)子(zi)(zi)(zi)(zi)通(tong)(tong)(tong)道(dao)(dao)(dao)的(de)(de)(de)(de)(de)結構、功能以及結構與(yu)(yu)功能的(de)(de)(de)(de)(de)關(guan)系對(dui)于從(cong)分(fen)子(zi)(zi)(zi)(zi)水平深(shen)入探討某些疾(ji)病(bing)的(de)(de)(de)(de)(de)病(bing)理(li)生(sheng)(sheng)理(li)機(ji)制、發現特異藥物或(huo)措施等(deng)(deng)均具有(you)十分(fen)重(zhong)要的(de)(de)(de)(de)(de)理(li)論和(he)(he)實際意義。膜(mo)(mo)片(pian)鉗技術(shu)是用玻璃微電(dian)(dian)極吸(xi)管把只含1-3個(ge)(ge)離(li)(li)子(zi)(zi)(zi)(zi)通(tong)(tong)(tong)道(dao)(dao)(dao)、面積(ji)為幾(ji)個(ge)(ge)平方微米(mi)的(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)膜(mo)(mo)通(tong)(tong)(tong)過負壓吸(xi)引封(feng)接起來。全(quan)自動膜(mo)(mo)片(pian)鉗

早期的(de)研究多使用雙電極電壓鉗(qian)技(ji)術作細胞內電活動的(de)記(ji)錄。日本全細胞膜(mo)片鉗(qian)系統

膜(mo)(mo)片鉗(qian)技(ji)(ji)術發展至今(jin)，已(yi)經成(cheng)為(wei)現代(dai)細(xi)胞電生(sheng)理的常規方法，它不僅可以作為(wei)基礎生(sheng)物(wu)醫(yi)學(xue)(xue)研(yan)究(jiu)(jiu)的工具，而且(qie)直接或間接為(wei)臨床醫(yi)學(xue)(xue)研(yan)究(jiu)(jiu)服(fu)務。目前膜(mo)(mo)片鉗(qian)技(ji)(ji)術廣泛應用(yong)于神經（腦）科學(xue)(xue)、心血管科學(xue)(xue)、藥(yao)理學(xue)(xue)、細(xi)胞生(sheng)物(wu)學(xue)(xue)、病理生(sheng)理學(xue)(xue)、中(zhong)醫(yi)藥(yao)學(xue)(xue)、植物(wu)細(xi)胞生(sheng)理學(xue)(xue)、運動(dong)(dong)生(sheng)理等多學(xue)(xue)科領域研(yan)究(jiu)(jiu)。隨著(zhu)全自動(dong)(dong)膜(mo)(mo)片鉗(qian)技(ji)(ji)術（Automaticpatchclamptechnology）的出(chu)現，膜(mo)(mo)片鉗(qian)技(ji)(ji)術因其具有(you)的自動(dong)(dong)化(hua)、高通量特性，在(zai)藥(yao)物(wu)研(yan)發、藥(yao)物(wu)篩選中(zhong)顯(xian)示了強(qiang)勁的生(sheng)命力。日本全細(xi)胞膜(mo)(mo)片鉗(qian)系統

本文來自沈陽喜(xi)納(na)多采暖工程有限公司(si)：//zjlong.cn/Article/02b399795.html